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高通量分析反相色譜柱

反相是應用最廣的HPLC保留方式,但極性很大的化合物常常不能充分保留在低百分比有機相中,甚至不能保留在100%含水流動(dòng)相中。對于含有相同組分的樣品,正相洗脫順序與RPC中的洗脫順序正好相反。盡管正相LC在傳統上采用非極性有機流動(dòng)相和硅固定相,但如今,多數正相分離法均采用含水有機流動(dòng)相和極性較強的鍵合固定相。該HPLC方式目前普遍稱(chēng)為HILIC,即親水作用色譜法。 如果采用強極性鍵合相(如TSKgel Amide-80),正相或親水作用色譜法(HILIC;見(jiàn)參考資料)可改善極性化合物的保留行為,其保留機理是使用乙腈與乙酸銨緩沖液的混合流動(dòng)相。與反相保留行為相反,在HILIC中,通過(guò)增加乙腈百分比可更長(cháng)時(shí)間地保留樣品中的極性成分。

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