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10 nm 孔徑、5 μm粒徑的TSKgel ODS-80TM 色譜柱和TSKgel ODS-80Ts 色譜柱用于分析小分子化合物,具有4種不同的化學(xué)官能團,能滿(mǎn)足各種分析需求。B型硅膠基質(zhì)材料具有高純度,且幾乎不含金屬離子雜質(zhì)。 此類(lèi)反相柱與單體鍵合化學(xué)物相結合,被公認為制藥應用方面的通用分析柱。
隱藏域元素占位
TSKgel ODS-100V 和 TSKgel ODS-100Z 具有與同類(lèi)色譜柱相比最佳的表面特性,能限制堿性、酸性及螯合化合物的第二類(lèi)相互作用。利用柱效高和峰形對稱(chēng)性好等優(yōu)點(diǎn)縮短分析和方法開(kāi)發(fā)的時(shí)間! 超高純度B型硅膠基質(zhì)材料只含有微量的金屬離子雜質(zhì)。此種硅與單體鍵合化學(xué)物相結合,制成了最好的通用反相柱,適用于質(zhì)量控制與研發(fā)過(guò)程中要求最高的分離處理。
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TSKgel ODS-120A 色譜柱采用 15 nm 孔徑的硅膠顆粒充填,排阻界限為10,000 Da,此款色譜柱非常適合用于分析肽、小分子蛋白和諸如多環(huán)芳烴等環(huán)境樣品。 "A" 代表色譜柱填料未進(jìn)行封端處理,如要分析帶電樣品,經(jīng)過(guò)封端處理的TSKgel ODS-120T 色譜柱是更好的替代選擇。 TSKgel ODS-120T 是對填料采用了三甲基硅烷封端處理過(guò)的色譜柱,以改善帶負電荷分析樣品的峰形。
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TSKgel Super-ODS、Super-Octyl 和 Super-Phenyl 色譜柱均由2.3 μm球形硅膠顆粒制備而成,孔徑為14 nm。色譜柱的硅顆粒大小非常均勻,能提供超過(guò)每米160,000 塔板的柱效率,但其壓降可與3 μm顆粒填充柱相媲美。除譜帶增寬作用降低而產(chǎn)生的靈敏度提高以外,Super系列的主要優(yōu)勢還在于節省時(shí)間和溶劑的消耗量。 注意:Super系列色譜柱的硅顆粒具有相對較小的空隙容積,因此會(huì )產(chǎn)生比其它大多數反相柱更短的保留時(shí)間。例如,為實(shí)現與TSKgel ODS-100V 相似的保留時(shí)間,TSKgel Super-ODS 色譜柱的流動(dòng)相有機溶劑百分比必須減少20~30% 左右。 TSKgel Super-Octyl 和TSKgel Super-Phenyl 色譜柱適用于親水和疏水肽、胰蛋白酶降解物、肽圖分析、低分子量藥物、咖啡堿、嘧啶、核苷和核苷酸的高通量分析。
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反相色譜法(RPC)是最常用的色譜分離模式之一,是研究分析小分子量化合物的首選技術(shù)手段。近年來(lái),反相色譜法也成為了分離多肽、蛋白質(zhì)及其它生物分子的公認方法。 TSKgel Protein C4-300 是東曹生命科學(xué)最新推出的一款反相色譜柱。它是專(zhuān)門(mén)針對重組蛋白、抗體片段或PEG蛋白等蛋白質(zhì)樣品的高分辨率分析而設計。TSKgel Protein C4-300 色譜柱的孔徑為30 nm,是分離蛋白質(zhì)的理想選擇。 TSKgel TMS-250 色譜柱是RPC法分析分子量較大蛋白質(zhì)的理想選擇。包含一個(gè)獨特的C1鍵合相,填料是通過(guò)將三甲基硅烷基單體結合到孔徑為25 nm的球形硅膠上制備而成。由于配體的疏水性較低,即使分析分子量較大的蛋白樣品仍然可以得到優(yōu)異的回收率。相對于大孔徑的C18柱,醛縮酶(158kDa)等蛋白質(zhì)可顯示出尖銳的峰形。
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TSKgel ODS-140HTP 色譜柱是采用高壓方式將粒徑2.3 μm的填料裝填于其中,是一款可以進(jìn)行高通量分析(高速/高分離效果)的反相色譜柱。 與常規的3 μm或5 μm粒徑的ODS色譜柱相比,可以進(jìn)行高速、高分離效果的分析測定。與粒徑小于2 μm的超高壓色譜柱相比,其又可以使用在普通的HPLC系統上而獲得高通量的分析測定。
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聚甲基丙烯酸基質(zhì)的反相色譜柱有較寬的孔徑和粒徑范圍可供選擇。盡管在分辨率和穩定性方面不如硅膠基質(zhì)的反相色譜柱,但是聚合物基質(zhì)的色譜柱具有以下優(yōu)勢: 更寬的pH使用范圍(1-12),可使許多堿性化合物在非帶電形式下得到分析,從而減少二次相互作用發(fā)生,進(jìn)而改善樣品峰形。 由于二次相互作用的降低,大大改善了多肽和蛋白的回收率。
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反相是應用最廣的HPLC保留方式,但極性很大的化合物常常不能充分保留在低百分比有機相中,甚至不能保留在100%含水流動(dòng)相中。對于含有相同組分的樣品,正相洗脫順序與RPC中的洗脫順序正好相反。盡管正相LC在傳統上采用非極性有機流動(dòng)相和硅固定相,但如今,多數正相分離法均采用含水有機流動(dòng)相和極性較強的鍵合固定相。該HPLC方式目前普遍稱(chēng)為HILIC,即親水作用色譜法。 如果采用強極性鍵合相(如TSKgel Amide-80),正相或親水作用色譜法(HILIC;見(jiàn)參考資料)可改善極性化合物的保留行為,其保留機理是使用乙腈與乙酸銨緩沖液的混合流動(dòng)相。與反相保留行為相反,在HILIC中,通過(guò)增加乙腈百分比可更長(cháng)時(shí)間地保留樣品中的極性成分。
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陽(yáng)離子交換色譜法采用含有硫離子的強陽(yáng)離子或含有羧甲基(CM)官能團的弱陽(yáng)離子交換劑??购怆x子(常為 Na+)維持電中性。 在離子交換色譜法中,流動(dòng)相緩沖劑的 pH 值必須在電荷分子 pI 值或 pKa 值與固定相上電荷基團的 pKa 值之間。例如,在陽(yáng)離子交換色譜法中, pI 值為 8.2 的分子在 pH 6.0 的流動(dòng)相緩沖劑中溶解,同時(shí)固定相 pKa 值為 1.2。
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陰離子交換色譜法采用含有季銨離子的強陰離子或采用具有叔胺或仲胺官能團(如DEAE,即二乙氨乙基)的弱陰離子交換劑??购怆x子(常為 Cl- )維持電中性。 在離子交換色譜法中,流動(dòng)相緩沖劑的pH 值必須在電荷分子 pI 值或 pKa 值與固定相上電荷基團 pKa 值之間。例如,在陰離子交換色譜法中, pI 值為 6.8 的分子在 pH 值為 8.0 的流動(dòng)相緩沖液中解離,同時(shí)固定相 pKa 為 10.3。
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