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出口食品中天然甜味劑甜菊糖苷、甜菊雙糖苷、甘草酸、甘草次酸的測定

發(fā)布時(shí)間：

2022-10-20 11:15

　　甜菊糖苷、甜菊雙糖苷（瑞鮑迪甙A）、甘草酸、甘草次酸

　　Stevia sugar、Rebaudioside A、Glycyrrhizic acid、glycyrrhetnic acid

　　【基本信息】

　　甜菊糖苷：甜菊糖（Stevioside）又稱(chēng)甜菊苷，它是從菊科植物（Stevia Rebaudia）該植物在我國稱(chēng)作甜葉菊)的葉子中提取出來(lái)的一種糖苷。甜葉菊原產(chǎn)于巴拉圭和巴西，現在中國、新加坡、馬來(lái)西亞等國家也有種植，其甜味成分由甜菊苷及甜菊A苷、B苷、C苷、D苷和E苷組成。甜菊苷可用水從干葉子中提取、澄清和結晶，實(shí)際生產(chǎn)中獲得了3種類(lèi)型，分別是粗提物和純度為50%及90%的產(chǎn)品。

　　甘草酸：.可用作甜味劑、調味劑、香味增強劑。我國民間慣用于醬及醬制品、腌漬品等。由于具有各種生理活性，具有養發(fā)育發(fā)的顯著(zhù)效果，可作為頭發(fā)營(yíng)養制品及護膚制品的添加劑。在護膚用品中使用可增強其他活性物在防曬、增白、止癢、調理、愈疤方面的療效。

　　甘草次酸：甘草（Glycyrrhize glabra L.）是常見(jiàn)的藥食兩用食品·甘草提取物作為天然的甜味劑廣泛用于糖果和罐頭食品。甘草的甜味來(lái)自甘草酸(Glycyrrhizic acid）和甘草次酸（Glycyrrhetinic acid）。前者是一類(lèi)三萜類(lèi)皂苷，約占甘草根干重的4%～5%，甜度為蔗糖的50倍·甘草次酸是由甘草酸水解脫去糖酸鏈而形成,甜度為蔗糖的250倍。甘草次酸具有細胞毒性，長(cháng)時(shí)間大量食用甘草糖（100g/d）可導致嚴重的高血壓和心臟肥大，臨床癥狀表現為鈉離子貯留和鉀離子的排出，嚴重者可導致極度虛弱和心室纖顫。

　　【溶液的配制】

　　色譜流動(dòng)相配制：流動(dòng)相A：20 mmol/L 磷酸水溶液

　　流動(dòng)相B：乙腈

　　流動(dòng)相C：甲醇

　　甜菊糖苷、甜菊雙糖苷對照溶液配制：各稱(chēng)取1 mg，用1 mL甲醇溶解，取出少量并稀釋至20μg/mL。

　　甘草酸、甘草次酸對照溶液配制：各稱(chēng)取0.5 mg，用1 mL甲醇溶解，取出少量并稀釋至10 μg/mL。

　　【分析條件】

　　儀器： Thermo Ultimate 3000

　　色譜柱：TSKgel ODS-100V（4.6 mm I.D.×15 cm，5μm）

　　色譜流動(dòng)相：流動(dòng)相A：20 mmol/L 磷酸水溶液

　　流動(dòng)相B：乙腈

　　流動(dòng)相C：甲醇

　　洗脫梯度：

時(shí)間/min

流動(dòng)相A/%

流動(dòng)相B/%

流動(dòng)相C/%

0

63

34

3

5

60

37

3

8

50

0

50

10

20

0

80

25

10

0

90

28

63

34

3

35

63

34

3

　　流速： 1.0 mL/min

　　柱溫： 30℃

　　進(jìn)樣量：10 μL

　　檢測器：紫外檢測器，210 nm&254nm

　　【分析結果】

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　　圖1 甜菊糖苷、甜菊雙糖苷色譜圖210nm（1 mg/mL）

峰序號

對照品名稱(chēng)

保留時(shí)間（min）

不對稱(chēng)因子

分離度

理論塔板數

1

甜菊糖苷

3.752

-

-

7902

2

甜菊雙糖苷

3.983

0.92

1.41

9799

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　　圖2 甜菊糖苷、甜菊雙糖苷色譜圖210nm（20 μg/mL）

峰序號

對照品名稱(chēng)

保留時(shí)間（min）

不對稱(chēng)因子

分離度

理論塔板數

1

甜菊糖苷

3.722

-

-

8676

2

甜菊雙糖苷

3.955

-

1.45

9557

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　　圖3 甘草酸、甘草次酸色譜圖254nm（0.5 mg/mL）

峰序號

對照品名稱(chēng)

保留時(shí)間（min）

不對稱(chēng)因子

分離度

理論塔板數

1

甘草酸

13.017

1.05

-

134529

2

甘草次酸

21.175

1.06

34.84

67364

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　　圖4 甘草酸、甘草次酸色譜圖254nm（10 μg/mL）

峰序號

對照品名稱(chēng)

保留時(shí)間（min）

不對稱(chēng)因子

分離度

理論塔板數

1

甘草酸

13.012

1.05

-

133193

2

甘草次酸

21.177

1.01

35.32

70160

　　結論：TSKgel ODS-100V（4.6 mm I.D.×15 cm，5μm）可以將甜菊糖苷、甜菊雙糖苷、甘草酸、甘草次酸分離出來(lái)，且甜菊糖苷與甜菊雙糖苷的分離度優(yōu)于檢疫標準中所附圖譜（見(jiàn)下圖附件），且對于標準中所提及的檢出限也可以滿(mǎn)足，符合出入境檢疫標準SN/T3854-2014中的要求。

　　附件：

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