正相色譜柱

TSKgel Amide-80 系列

使用說(shuō)明書(shū)

東曹株式會(huì )社

安全注意事項

為防止財產(chǎn)損失、確保個(gè)人安全，請在使用本產(chǎn)品之前，仔細通讀本說(shuō)明書(shū)。

［注意標簽］

標簽 說(shuō)明

警告 警告用戶(hù)可能存在嚴重受傷或死亡的危險。

注意 警告用戶(hù)可能存在設備損壞或受傷的危險。

警告

■ 遠離火源

使用易燃溶劑時(shí)，請務(wù)必小心。否則可能會(huì )導致火災、爆炸或中毒。

注意

■ 使用環(huán)境必須通風(fēng)良好

如果通風(fēng)不良，易燃或有毒溶劑可能會(huì )導致火災、爆炸或中毒。

■ 請勿噴灑溶劑

溶劑發(fā)生噴灑或泄露可能會(huì )導致火災、觸電、中毒、受傷以及腐蝕。

清除漏出的溶劑時(shí)，請佩戴合適的護具。

■ 請佩戴護目鏡和防護手套

有機溶劑和酸屬于有害物質(zhì)，切勿直接接觸皮膚。

■ 請小心處理包裝

處理不當可能會(huì )導致產(chǎn)品破裂或溶劑飛濺。

■ 請勿將本產(chǎn)品用于其他目的

本產(chǎn)品僅可用于分離和提純，請勿用于其他用途。

■ 請確認化合物的安全性

請確認分離和提純后的化合物和溶劑安全可靠。

■ 正確廢棄

請根據當地法律法規正確廢棄。

注

■ 請妥善保管本說(shuō)明書(shū)，以便日后參閱。

注意事項：出廠(chǎng)溶劑

吸入

·請將患者轉移到空氣清新的區域，并用清水反復清洗口部。

·請立即就醫。

皮膚接觸 ·請用肥皂水和清水反復沖洗接觸位置。

眼睛接觸

·請盡量睜大眼睛，并用清水沖洗至少十五分鐘。

·請立即就醫。

急救

食入 ·請立即用清水反復漱口，并立即就醫。

通風(fēng) ·請保證充分通風(fēng)，確?？諝庵杏袡C溶劑的濃度在規定范圍。

柱子操作 ·野蠻操作可能會(huì )損壞柱子。

佩戴適當的護具

·使用本產(chǎn)品時(shí)，請佩戴防溶劑手套和護目鏡。操作本產(chǎn)品時(shí)，最好

能夠使用防毒面具、防護服和橡膠靴。

操作和保存

保存 ·運輸或保存本產(chǎn)品時(shí)，如果使用了易燃溶劑，請遠離火源和熱源。

處理方法 ·請根據當地法律法規正確廢棄。本產(chǎn)品可以進(jìn)行焚燒處理。

一般注意事項 ·請務(wù)必遵守與本產(chǎn)品的操作和保存相關(guān)的所有安全注意事項。

處理廢棄物

廢棄時(shí)的注意事項

·焚燒含有乙腈的溶劑時(shí)，請采取適當的應對措施。焚燒時(shí)產(chǎn)生的廢

氣可能含有氮氧化物。

出廠(chǎng)溶劑：

CH3CN/H2O=85/15：TSKgel Amide-80 3 μm，TSKgel Amide-80 HR 5 μm

CH3CN/H2O=75/25：TSKgel Amide-80 5 μm，TSKgel Amide-80 10 μm，TSKgel guardgel Amide-80

5 μm（2.0 mm I.D.×1 cm），TSKgel guardcolumn Amide-80 10 μm

C2H5OH/H2O=50/50：TSKgel guardgel Amide-80 3 μm（2.0 mm l.D.×1 cm），TSKgel guardgel Amide-80 3 μm

（3.2 mm l.D.×1.5 cm），TSKgel guardgel Amide-80 5 μm（3.2 mm l.D.×1.5 cm）

注意事項：填料

吸入

·請將患者轉移到空氣清新的區域，并用清水反復清洗口部。

·請立即就醫。

皮膚接觸 ·請用肥皂水和清水反復沖洗接觸位置。

眼睛接觸

·請盡量睜大眼睛，并用清水沖洗至少十五分鐘。

·請立即就醫。

急救

食入 ·請立即用清水反復漱口，并立即就醫。

通風(fēng) ·請保證充分通風(fēng)，確?？諝庵杏袡C溶劑的濃度在規定范圍。

柱子操作 ·野蠻操作可能會(huì )損壞柱子。

佩戴適當的護具

·使用本產(chǎn)品時(shí)，請佩戴防溶劑手套和護目鏡。操作本產(chǎn)品時(shí)，

最好能夠使用防毒面具、防護服和橡膠靴。

操作和保存

保存 ·運輸或保存本產(chǎn)品時(shí)，如果使用了易燃溶劑，請遠離火源和熱源。

處理方法 ·請根據當地法律法規正確廢棄。

一般注意事項 ·請務(wù)必遵守與本產(chǎn)處理廢棄物 品的操作和保存相關(guān)的所有安全注意事項。

廢棄時(shí)的注意事項 ·焚燒時(shí)產(chǎn)生的廢氣可能含有氮氧化物。

填料：氨基甲酰鍵合在硅膠上

目 錄

1. 簡(jiǎn)介............................................................................................................................................. 1

2. 打開(kāi)包裝...................................................................................................................................... 1

3. 色譜柱部件................................................................................................................................... 1

4. 安裝色譜柱................................................................................................................................... 2

5. 色譜柱的維護............................................................................................................................... 3

6. 溶劑的選擇和準備........................................................................................................................ 4

7. 流速............................................................................................................................................. 5

8. 溫度............................................................................................................................................. 6

9. 準備樣品...................................................................................................................................... 6

10. 理論塔板數和不對稱(chēng)因子的計算方法.......................................................................................... 6

11. 保護柱........................................................................................................................................ 7

12. 故障排除.................................................................................................................................. 10

13. 質(zhì)量標準和質(zhì)量保證................................................................................................................. 10

14. 色譜柱清洗溶液........................................................................................................................ 11

1

1. 簡(jiǎn)介

TSKgel Amide-80 系列色譜柱是一款優(yōu)化的親水相互作用色譜柱。使用前，請仔細閱讀本使用說(shuō)

明書(shū)，確保正確使用色譜柱，以便充分發(fā)揮產(chǎn)品的性能。

2. 打開(kāi)包裝

請先確認包裝外觀(guān)及色譜柱是否完整。

圖1 包裝外觀(guān)

然后確認色譜柱配有以下文件：

使用說(shuō)明書(shū) 1 份

檢測報告（Inspection Data） 1 份

3. 色譜柱部件

TSKgel Amide-80 5 μm（4.6 mm（I.D.）×25 cm（L）），TSKgel Amide-80 10 μm

柱批次號

柱類(lèi)型

出口

TSKgel

TYPE

C. No

流向

進(jìn)口

末端接頭

保護塞

螺母

2

TSKgel Amide-80 3 μm，TSKgel Amide-80 HR 5 μm 和半微型色譜柱

流向

TSKgel:

C. No

進(jìn)口 出口

保護塞

末端接頭

柱批次號

柱類(lèi)型

保護柱（3.2 mm（I.D.）×1.5 cm（L））

柱套（進(jìn)口） 保護柱柱芯 柱套（出口） 色譜柱取出工具

保護柱（2.0 mm（I.D.）×1 cm（L））

柱套（進(jìn)口） 保護柱柱芯柱套（出口）

圖2 色譜柱部件

4. 安裝色譜柱

（1） 確認柱標牌上的產(chǎn)品名稱(chēng)正確無(wú)誤。

（2） 每根色譜柱都配有一個(gè)連接螺母用于連接1/16 英寸的毛細管管路。連接螺母以美國標準的

壓縮接頭和金屬環(huán)方式設計的。

3

（3） 根據圖2 中色譜柱柱標牌上的或蝕刻的箭頭方向確認色譜柱的進(jìn)液方向。僅可從進(jìn)口側向

色譜柱中注入溶劑。只有按色譜柱上標示的進(jìn)液方向進(jìn)行進(jìn)液時(shí)，才能獲得色譜柱的最佳

分辨率。

（4） 請使用流動(dòng)相清除管路中的所有空氣，這有助于防止空氣進(jìn)入色譜柱。管路中的空氣會(huì )對

柱效造成嚴重影響。

（5） 請先將溶劑的流速設置為實(shí)際流速的一半。確認系統中的溶劑可以順暢地從管路末端流出。

（6） 從色譜柱上取下保護塞，將進(jìn)樣器前面的管路連接到色譜柱的進(jìn)口。請將管路完全插入壓

縮接頭后再擰緊，確保將死體積降到最小。請務(wù)必將設備中的死體積降到最小。

（7） 溶劑從色譜柱的出口側流出后，請將色譜柱連接到檢測器。

（8） 以最終流速一半以下的流速注入溶劑，避免色譜柱受到突然的壓力變化。

（9） 色譜柱對壓降的脈動(dòng)式變化非常敏感。請使用沒(méi)有脈沖的泵。

（10） 使用前，請向色譜柱注入至少10 倍柱體積的溶劑平衡色譜柱。

（11） 產(chǎn)品名稱(chēng)沒(méi)有標注在保護柱柱芯（2.0 mm（I.D.）×1 cm（L））上。請確認包裝盒上的產(chǎn)品名

稱(chēng)。柱身上有標記線(xiàn)。（TSKgel guardgel Amide-80 3 μm：4 條線(xiàn)， TSKgel guardgel Amide-80

5 μm：5 條線(xiàn)）

（12） 用于連接TSKgel Amide-80 5 μm 半微型色譜柱（1.0 mm（I.D.））的部件如表1 所示。

表1 特殊部件

管路 螺母（5 個(gè)/組） 金屬環(huán)（10 個(gè)/組）

不銹鋼（50 μm（I.D.））

PEEK（50 μm（I.D.））

貨號 0006160

貨號 0017897

貨號 0019079

貨號 0017140

5. 色譜柱的維護

（1）如果需要每天使用色譜柱，而且流動(dòng)相不具有腐蝕性，則可直接流動(dòng)相保存色譜柱過(guò)夜。如

果流動(dòng)相中含有鹵素離子，則最好能夠使用適當的溶劑（例如，檢測報告中列舉的出貨溶劑）

替換流動(dòng)相。

4

（2） 如果數天內不會(huì )使用色譜柱，請按以下步驟保存色譜柱：

a）請以表2 中的操作流速一半的流速，使用檢測報告中列舉的出貨溶劑保存色譜柱（如果使

用了高鹽的緩沖液作為流動(dòng)相，請使用超純水清洗設備）。

b）請從設備上取下色譜柱，并使用隨附的保護塞封住色譜柱的末端。

c）請將色譜柱在溫度相對穩定的環(huán)境下保存。保存時(shí)，請勿讓色譜柱冷凍。

（3） 反復從柱套上取下保護柱柱芯會(huì )降低保護柱的性能。推薦將保護柱兩端蓋上保護塞后保存在柱套

中。

6. 溶劑的選擇和準備

（1） 如檢測報告中列舉的出貨溶劑所示，不同的色譜柱，出廠(chǎng)溶劑也不同。使用前，請使用適

當的分析用流動(dòng)相替換該溶劑。替換溶劑時(shí)，使用的流速應為正常流速的一半，或使用的

壓降應低于表2 中的最大壓降。注意，溶劑成分劇烈變化或頻繁替換溶劑可能會(huì )降低色譜

柱的壽命。

（2） pH 值范圍：2.0～7.5

pH 值的范圍由填料和色譜柱自身的穩定性決定。pH 值低于2.0 時(shí)，硅膠基質(zhì)的配位結合

點(diǎn)受酸性溶液影響容易發(fā)生水解。pH 值高于7.5 時(shí)，硅膠基質(zhì)會(huì )溶解，導致色譜柱發(fā)生故

障。另外，低pH 值條件下，尤其是使用鹵素物質(zhì)時(shí)，鋼制色譜柱會(huì )發(fā)生腐蝕。

（3） 應使用微孔過(guò)濾器（0.5 μm）過(guò)濾溶劑，防止顆粒雜質(zhì)進(jìn)入色譜柱。顆粒雜質(zhì)的污染會(huì )降

低半微型色譜柱的性能。因此，強烈建議在泵和進(jìn)樣器之間安裝孔徑在0.2～0.5 μm 之間

的在線(xiàn)過(guò)濾器。

在線(xiàn)過(guò)濾器

部件貨號 0014594 Filter assembly

部件貨號 0006280 Fluoropore filter（0.45 μm，100 枚/組）

（4） 應對溶劑進(jìn)行脫氣，確保溶劑可以順暢地注入到色譜柱。

5

7. 流速

應根據所需分辨率、色譜柱壽命以及分析時(shí)間選擇適當的流速。雖然TSKgel Amide-80 系列色譜

柱適用于高速分析，我們還是建議使用相對較低的流速操作色譜柱，這樣可以提高分辨率和延長(cháng)色譜

柱的壽命。推薦流速和最大流速主要取決于流動(dòng)相中的有機溶劑。首次使用TSKgel Amide-80 系列時(shí)，

應按6 cm/min 的線(xiàn)性流速設置體積流速（1.0 mm（I.D.）為0.05 mL/min，2.0 mm（I.D.）為0.20 mL/min，

3.0 mm（I.D.）為0.43 mL/min 和4.6 mm（I.D.）為1.00 mL/min）。如果在最大壓降附近操作色譜柱，

則會(huì )降低色譜柱的壽命。TSKgel Amide-80 系列的最大壓降如表2 所示。選擇流速時(shí)，也需要考慮溶

劑的粘度。

表2 最大壓降

貨號 產(chǎn)品名稱(chēng)

色譜柱尺寸

mm（I.D.）×cm（L）

最大壓降

（MPa）

0021864

0021865

0022850

0022851

0022852

0021866

0022849

0021867

TSKgel Amide-80 3 μm

〃

〃

〃

〃

〃

〃

〃

2.0×5

2.0×15

3.0×5

3.0×10

3.0×15

4.6×5

4.6×10

4.6×15

20.0

20.0

20.0

20.0

20.0

20.0

20.0

20.0

0020009

0020010

0021486

0021487

0019694

0019695

0019696

0019697

0013071

TSKgel Amide-80 5 μm

〃

〃

〃

〃

〃

〃

〃

〃

1.0×5

1.0×10

1.0×15

1.0×25

2.0×5

2.0×10

2.0×15

2.0×25

4.6×25

3.0

6.0

9.0

12.0

4.0

8.0

10.0

15.0

15.0

0021982 TSKgel Amide-80 HR 5 μm 4.6×25 15.0

0014459

0014460

TSKgel Amide-80 10 μm

〃

7.8×30

21.5×30

7.0

3.0

6

8. 溫度

色譜柱的最佳操作溫度如下所示：

TSKgel Amide-80 5 μm，TSKgel Amide-80 HR 5 μm，TSKgel Amide-80 10 μm：10 ℃～80 ℃

TSKgel Amide-80 3 μm：10 ℃～50 ℃

9. 準備樣品

（1） 準備樣品溶液

請用流動(dòng)相稀釋或溶解樣品。請調整流動(dòng)相的pH 值、鹽濃度等，使樣品可以完全溶解，防

止樣品在色譜柱上沉淀，降低色譜柱的壽命。

（2） 清除不溶物

請使用微孔過(guò)濾器（0.5 μm）過(guò)濾樣品溶液。即使在樣品溶液中看不到任何雜質(zhì)，也可能

存在不溶物質(zhì)。

10. 理論塔板數和不對稱(chēng)因子的計算方法

（1） 理論塔板數（N）的計算方法

如圖3 中所示，通過(guò)半峰寬法計算色譜柱的理論塔板數。

Ve

h

W

進(jìn)樣

1/2

1/2h

圖3 理論塔板數的計算方法

N = 5.54（Ve/W1/2）2

7

其中：

Ve ：洗脫時(shí)間

W1/2 ：半峰寬

h ：峰高

N ：理論塔板數/柱

（2） 不對稱(chēng)因子（As）的計算方法

通過(guò)1/10 h 法計算色譜柱的不對稱(chēng)因子（As）。

Ve

h

a b

進(jìn)樣

1/10h

圖4 不對稱(chēng)因子的計算方法

As=b/a

（3） 測定N 和As 時(shí)，儀器的死體積應盡可能的小。

（4） N 和As 及其測定條件如檢測報告所示。

11. 保護柱

第 4～9 節概括了主要問(wèn)題的應對方法。如果樣品中出現了可能會(huì )被填料吸附的雜質(zhì)，則會(huì )吸附在

色譜柱的進(jìn)口側并逐漸聚集，導致理論塔板數減少，柱效降低。此時(shí)，在進(jìn)樣閥和分析柱之間安裝保

護柱，可以保護色譜柱的性能。如果保護柱上吸附了大量的雜質(zhì)導致柱效降低，請更換保護柱。但是，

不可將保護柱用于分析。安裝保護柱后，不會(huì )增加分析柱的分辨率。

8

11-1 保護柱的作用

（1） 通過(guò)清除樣品中的吸附物和不溶物，可以防止污染分析柱。

（2） 可以避免泵脈動(dòng)引起的壓降破壞分析柱。

11-2 保護柱的種類(lèi)和選擇

保護柱的具體規格如表3 所示。

表3 保護柱信息

貨號 產(chǎn)品名稱(chēng)

保護柱或保護柱柱芯尺寸

mm（I.D.）×cm（L）

對應的分析柱

0014461

0021941

0019010

0021862

0021863

TSKgel guardcolumn Amide-80 10 μm

TSKgel guardgel Amide-80 5 μm

TSKgel guardgel Amide-80 5 μm

TSKgel guardgel Amide-80 3 μm

TSKgel guardgel Amide-80 3 μm

21.5×7.5

2.0×1

3.2×1.5

2.0×1

3.2×1.5

TSKgel Amide-80 10 μm

（21.5×30）

TSKgel Amide-80 5 μm

（2.0×5，10，15，25）

TSKgel Amide-80 5 μm

（4.6×25）

TSKgel Amide-80 HR 5 μm

（4.6×25）

TSKgel Amide-80 3 μm

（2.0×5，15）

（3.0×5，10，15）

TSKgel Amide-80 3 μm

（4.6×5，10，15）

注：每個(gè)包裝盒中含有三根TSKgel guardgel 保護柱柱芯。

柱套的具體規格如表4 所示。

表 4 柱套信息

貨號 產(chǎn)品名稱(chēng)

對應保護柱柱芯尺寸

mm（I.D.）×cm（L）

0019308

0019018

Cartridge holder（2.0×1）

Cartridge holder（3.2×1.5）

2.0×1

3.2×1.5

9

注：柱套還配有以下配件：兩個(gè)螺母、兩個(gè)金屬環(huán)和兩個(gè)短管。

另外，色譜柱取出工具的貨號為0019018。

11-3 更換保護柱

由于保護柱的吸附量有限，其壽命也比較短。必須在分析柱受到污染之前，更換保護柱。由于更

換保護柱涉及到多種因素，如使用目的、樣品性質(zhì)（主要成分的性質(zhì)、雜質(zhì)的性質(zhì)以及含量等）、樣品

進(jìn)樣量、溶劑、流速等，因此無(wú)法將更換保護柱的頻率進(jìn)行標準化規定。操作時(shí)壓力上升表示保護柱

的末端接頭發(fā)生了堵塞或填料發(fā)生了污染，因此在壓力升高到一定范圍時(shí)，最好能夠更換保護柱。一

般而言，如果測定數據發(fā)生異常，應立即更換保護柱。

11-4 散裝填料

散裝填料的信息如表5 所示。

表5 散裝填料

產(chǎn)品名稱(chēng) 貨號 重量

TSKgel Amide-80 5 μm 0013072 5 g

TSKgel Amide-80 5 μm 0013073 10 g

TSKgel Amide-80 10 μm 0014462 10 g

10

12. 故障排除

（1） 進(jìn)口過(guò)濾器堵塞

壓降下降或流速降低表示進(jìn)口過(guò)濾器發(fā)生了堵塞。此時(shí)，請向色譜柱中反向進(jìn)液，清洗接

頭（流速必須低于表2 中的流速的一半）。

（2） 污染

長(cháng)時(shí)間使用色譜柱，可能會(huì )逐漸聚集大量的強離子化合物或疏水性化合物。這會(huì )導致分析

行為異常、分辨率降低。注入與流動(dòng)相極性不同的溶劑可以清除色譜柱上吸附的雜質(zhì)。

（3） 柱頭塌陷

如果沒(méi)有正確清洗色譜柱，則會(huì )由于柱床壓縮導致柱頭塌陷?？梢匀∠轮^確認柱床是否塌

陷。

13. 質(zhì)量標準和質(zhì)量保證

13-1 檢測報告

有關(guān)檢測條件和檢測結果的內容，請參見(jiàn)檢測報告。其中，理論塔板數是指單根色譜柱的值。每

根色譜柱的檢測結果是不同的。

13-2 質(zhì)量標準

TSKgel Amide-80 系列的出廠(chǎng)標準見(jiàn)表6。

13-3 質(zhì)量保證

收到產(chǎn)品后，請根據10 節的內容確認色譜柱的外觀(guān)并檢查其性能。如果產(chǎn)品無(wú)法達到表6 中所記

載的性能，請在兩周內聯(lián)系當地東曹銷(xiāo)售代表或東曹當地代理。

注：色譜柱的壽命不屬于保修范圍。

11

表6 質(zhì)量標準

貨號 產(chǎn)品名稱(chēng)

色譜柱尺寸

mm（I.D.）×cm（L）

理論塔板數

（TP/Column）

不對稱(chēng)因子

0021864

0021865

0022850

0022851

0022852

0021866

0022849

0021867

TSKgel Amide-80 3 μm

〃

〃

〃

〃

〃

〃

〃

2.0×5

2.0×15

3.0×5

3.0×10

3.0×15

4.6×5

4.6×10

4.6×15

3,500

13,000

5,500

11,000

16,000

6,000

12,000

18,500

0.90～1.25

0.90～1.25

0.90～1.25

0.90～1.25

0.90～1.25

0.90～1.20

0.90～1.20

0.90～1.20

0020009

0020010

0021486

0021487

0019694

0019695

0019696

0019697

0013071

TSKgel Amide-80 5 μm

〃

〃

〃

〃

〃

〃

〃

〃

1.0×5

1.0×10

1.0×15

1.0×25

2.0×5

2.0×10

2.0×15

2.0×25

4.6×25

300

600

4,000

6,000

1,000

2,000

4,000

6,000

8,000

1.0～2.0

1.0～2.0

0.7～1.8

0.7～1.8

0.7～1.8

0.7～1.8

0.7～1.8

0.7～1.8

－0021982 TSKgel Amide-80 HR 5 μm 4.6×25 18,000 0.90～1.30 0014459  0014460

TSKgel Amide-80 10 μm〃 7.8×30

1.5×30

5,000

8,000

－

－

14. 色譜柱清洗溶液

（1） 樣品性質(zhì)：疏水性化合物

水溶性有機溶劑，如含70～95 %乙腈和甲醇的緩沖溶液

（2） 樣品性質(zhì)：親水性化合物

水溶性有機溶劑，如含5～10 %乙腈和甲醇的緩沖溶液

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