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Sephadex LH-20/葡聚糖凝膠填料

發(fā)布時(shí)間：

2022-10-20 11:16

　　Sephadex LH-20/葡聚糖凝膠簡(jiǎn)介：

　　　全稱(chēng)為：羥丙基葡聚糖凝膠。常用商品凝膠的一種（另一種為交聯(lián)葡聚糖凝膠Sephadex G)。Sephadex LH-20為Sephadex G-25（葡聚糖凝膠按交聯(lián)度分類(lèi)的其中一種商品型號）經(jīng)羥丙基化處理后得到的產(chǎn)物，此時(shí)，葡聚糖凝膠分子中的葡萄糖部分將與羥丙基結合成下列醚鍵形式：-OH → -OCH2CH2CH2OH

　　與Sephadex G比較，Sephadex LH-20分子中-OH基總數雖無(wú)改變，但碳原子數所占比例卻相對增加了，所以Sephadex LH-20不僅可在水中應用，也可在極性有機溶劑或他們與水組成的混合溶劑中膨潤使用。

　　1、適合用有機溶劑分離嗜脂性分子，可以非常經(jīng)濟地大規模制備各種天然產(chǎn)物

　　2、結合凝膠過(guò)濾、分配色譜及吸附性層析于一身，分離結構非常相近的分子

　　3、載量可高達300mg樣品/ml凝膠，極少需要再生，分離效果可保持十幾年不變。

　　Sephadex LH-20/葡聚糖凝膠主要性能參數：

　　分離范圍（球蛋白）100-4000

　　顆粒大?。é蘭）20-150

　　應用范圍膽固醇，脂肪酸，激素，維他命，天然產(chǎn)物

　　pH穩定性2－13

　　最高流速（cm/h）500

　　Sephadex LH-20/葡聚糖凝膠/乙酸乙酯分離系統的原理及應用

　　除了以甲醇、丙酮、二氯甲烷為流動(dòng)相外，我們還可以使用乙酸乙酯為流動(dòng)相，以Sephadex LH-20為固定相，對某些混合物進(jìn)行分離。乙酸乙酯，一種中等極性的疏質(zhì)子溶劑，在分離某些低分子量有機物時(shí)，優(yōu)于丙酮和二氯甲烷。在對混合物的洗脫順序上，乙酸乙酯與丙酮、二氯甲烷相同，但其所使用的固定相Sephadex LH-20的柱床體積較小，分離速度更快。除此之外，Sephadex LH-20在乙酸乙酯中的膨脹程度小于在丙酮中的膨脹程度，因此，導致了膨脹后的Sephadex LH-20凝膠孔體積變小，孔徑變窄，從而使其更易吸附低分子量的中等極性有機化合物，分離效果更好。乙酸乙酯對混合物進(jìn)行分離的原理，主要是基于待分離物質(zhì)間的極性和氫鍵的差異。

　　Sephadex LH-20/葡聚糖凝膠分離的技巧：

　　?。?）分離時(shí)流速不可太快，切切不可心急，所謂欲速則不達；接餾分時(shí)可開(kāi)全速，節省時(shí)間。

　?。?）柱子盡可能長(cháng)，Sephadex LH20柱長(cháng)的增加將極大地改善分離，所不要吝惜填料，寧可將填料全裝在一根大柱子中，不要將填料裝成幾根小柱。所謂集中優(yōu)勢兵力，打擊敵人。

　?。?）餾分一定要接的細，可1/10，或1/20個(gè)保留體積接成一餾分。

　?。?）洗脫體積一般為2-3個(gè)保留體積，對特殊保留強的化合物，可洗脫5個(gè)保留體積。

　?。?）鞣質(zhì)成分死吸附嚴重，如不在乎填料者，可用Sephadex LH20分鞣質(zhì)

　?。?）Sephadex LH20對黃酮類(lèi)成分的分離效果極佳，方法很成型，有大量文獻參考。

　?。?）填料反復使用，每次用完，一般可用甲醇將柱子洗干凈，然后用下一次分離的起步溶劑將甲醇替換出來(lái)，待用。暫時(shí)不用試可以水洗→含水醇洗（醇的濃度逐步遞增）→醇洗，最后泡在醇中貯于磨口瓶中備用。如長(cháng)期不用時(shí)，可在以上處理基礎上，減壓抽干，再用少量乙醚洗凈抽干，室溫充分揮散至無(wú)醚味后，60～80°C干燥后保存。

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